Реферат
на тему: «Прогноз, лечение и профилактика оспы натуральной»
Введение
По данным С. С. Маренниковой, Э. Б. Гуревич, М. А. Юмашевой (1959), вирус О. н. успешно выделяется от больных из везикулярной жидкости и суспензии корок в культуре кожно-мышечной ткани эмбриона человека. Авторы получали ткань из свежих аборталышх соскобов от 8—11-недельных плодов. Трипсинизированные однослойные культуры выращивались в 0,5% растворе гидролизата лактальбумина с добавлением 15% сыворотки человека.
Для заражения использовали взвеси, содержащие по 150 000 клеток в 1 мл, которые разливали в пробирки и инкубировали 3 дня при 1° 36°. Затем раствор заменяли свежим и производили засев исследуемого материала в пробирки с наличием сплошного клеточного пласта. Для индикации вируса в ткани служила дегенерация клеток (цитопатогенное действие вируса) и гемадсорбция.
Для реакции гемадсорбции 0,2 мл 0,5% взвеси куриных эритроцитов (высокочувствительных к гемагглютинирующему действию вируса вакцины) добавляли в каждую пробирку о культурой ткани через 24 часа после заражения.
После макроскопического обследования участок оболочки с поражениями подвергают микроскопии (приготовляют окрашенные препараты) и пассажу на свежие эмбрионы. Для этой цели оболочки измельчают в ступке и в виде взвеси на физиологическом растворе 1 : 3 центрифугируют 10 мин. при 1500 об/м. В работе используют надосадочную жидкость. При отсутствии бляшек на оболочке вскрытых эмбрионов делают два «слепых» пассажа и только после этого регистрируют отрицательный результат.
Выделение вируса оспы натуральной в тканевых культурах удается при использовании перевиваемых эпителиальных клеток человеческого или обезьяньего происхождения, которые дают как размножение вируса, так и дегенерацию клеток — цитопатогенное действие (В. Д. Соловьев и Ю. Н. Мастюкова, 1958). Эти же авторы показали, что наиболее быстрым методом индикации вируса является реакция гемадсорбции, позволяющая не только выявлять его наличие в ткани, но и определять специфичность путем добавления иммунной сыворотки, подавляющей гемадсорбцию. Для этой же цели могут служить трипсинизированные однослойные культуры клеток, приготовленные из органов человека и обезьян.
При наличии смешанной популяции эпителиальных клеток и фнбробластов под действием вируса оспы натуральной преимущественной дегенерации подвергаются первые, а вторые длительное время остаются интактными. Это помогает дифференцировать цитопатогенное действие вируса оспы натуральной от вируса вакцины, который обладает выраженной цитопатогенностью как для эпителия, так и для соединительной ткани.
Диагностические исследования методом тканевых культур проводятся по следующей схеме:
Заражение развивающихся куриных зародышей и тканевых культур является наиболее чувствительным, быстрым и точным методом лабораторной диагностики оспы натуральной. Идентификация выделенного вируса и его дифференциация производятся по признакам, упомянутым выше. Затруднительнее всего дифференциация вируса оспы натуральной от вируса вакцины. Здесь дополнительно может быть применено внутри-кожное (или накожное) заражение вирусом оспы натуральной кроликов. Оно дает положительный результат лишь при введении концентрированного или слаборазведенного материала и обычно не передается в пассажах от кролика к кролику. ............